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產(chǎn)品名稱:Solarbio 大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):P8980

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):Solarbio 大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒
注意事項(xiàng):
A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無(wú)菌產(chǎn)品,為延長(zhǎng)分離液保存時(shí)間,請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌條件下啟封,避免微生物污染。
B. 分離液使用時(shí)應(yīng)始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條
件下離心,可能會(huì)導(dǎo)致白膜層中紅細(xì)胞污染加重。
C. 待分離的組織要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

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P8980Solarbio 大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒的詳細(xì)資料:

Solarbio 大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒

單個(gè)核細(xì)胞分離方法 1. 制備骨髓的單細(xì)胞懸液。 2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,加入與骨髓單細(xì)胞懸液等量的分離液(分離液少不得少于3 mL,總體積不能超過離心管的三分之二,否則會(huì)影響分離效果)。 3. 小心吸取單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取單細(xì)胞懸液,然后小心的平鋪于分離液上,因?yàn)閮烧叩拿芏炔町?,將形成明顯的分層界面。) 4. 室溫,500~900g,離心20~30min。(根據(jù)骨髓單細(xì)胞懸液的量確定離心條件,單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件可以自行摸索,以達(dá)到分離效果)。 5. 離心后,此時(shí)離心管中由上下細(xì)胞分四層。層為稀釋液層;第二層為環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層;第三層為透明分離液層;第四層為紅細(xì)胞層。 6. 用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層另一潔凈的15mL 離心管中,向離心管中加入10ml細(xì)胞洗滌液洗滌白膜層細(xì)胞,250g,離心10min。 7. 棄上清,5mL的PBS或細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞,250g,離心10min。 8. 重復(fù)步驟7 9. 棄上清,細(xì)胞重懸備用。 骨髓單細(xì)胞懸液的制備方法小動(dòng)物骨髓的采集: 1. 處死動(dòng)物,無(wú)菌提取股骨和脛骨,剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔(注意盡可能少的剪走骨髓腔)。 2. 取1ml的無(wú)菌注射器,吸取少量的含有10%標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的稀釋液或者是含有血清的培養(yǎng)基,沖洗骨髓腔以獲得骨髓。 3. 終制備成2×10 8–1×10 9 /ml 的單細(xì)胞懸液備用。大動(dòng)物骨髓的采集:分層示意圖大動(dòng)物骨髓的采集可采取活體穿刺方法:先將動(dòng)物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚,然后估計(jì)好皮膚到骨髓的距離,把骨髓穿刺針的長(zhǎng)度固定好。操作人員用左手把穿刺點(diǎn)周圍的皮膚繃緊,右手將穿刺針在穿刺點(diǎn)垂直刺入,輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入,當(dāng)穿刺針進(jìn)入骨髓腔時(shí)常有落空感。連接注射器緩慢抽吸骨髓組織,當(dāng)注射器內(nèi)抽到少許骨髓時(shí)即停止抽吸。用含10%標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的稀釋液調(diào)整細(xì)胞濃度為2×10 8–1×10 9/ml 的單細(xì)胞懸液備用。常用的骨髓穿刺點(diǎn):股骨:穿刺部位在股骨內(nèi)側(cè)面,靠下端的凹面處;胸骨:穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處;肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各點(diǎn)的中點(diǎn);脛骨:穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔,防止發(fā)生氣胸。 注意事項(xiàng): A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無(wú)菌產(chǎn)品,為延長(zhǎng)分離液保存時(shí)間,請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌條件下啟封,避免微生物污染。 B. 分離液使用時(shí)應(yīng)始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會(huì)導(dǎo)致白膜層中紅細(xì)胞污染加重。 C. 待分離的組織要求新鮮,避免冷凍和冷藏。 D. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞掛壁影響分離效果。 E. 如果要進(jìn)一步對(duì)分離的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),那在制備單細(xì)胞懸液和分離過程中,注意無(wú)菌操作,避免微生物污染

Solarbio 大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒

產(chǎn)品特點(diǎn):

1. 產(chǎn)品內(nèi)毒素水平已低于 0.12EU/ml、0.06EU/ml 甚可忽略不計(jì);
2. 產(chǎn)品經(jīng)過逐瓶燈檢基本可控制其中不含不溶性微粒物;
3. 產(chǎn)品原料具有生物安全性和可追溯性;
4. 產(chǎn)品全生產(chǎn)過程*按照國(guó)家 GMP 標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行;
5. 產(chǎn)品包裝瓶的安全性及可追溯性;
 

 

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